注射用兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠乳化粉碎制備設(shè)備：

用于美*醫(yī)*用途的可注*凝膠發(fā)展迅速，可注*凝膠能在注射部位實(shí) 現(xiàn)微*治*的美容作用，而受到廣泛關(guān)注。但是目前市面上的透明質(zhì)酸凝膠產(chǎn)品降解期短， 很難保證中長(zhǎng)效果。要達(dá)到上述目的，必須改進(jìn)在透明質(zhì)酸凝膠中的添加成分。其中人工化 學(xué)合成的高分子材料與動(dòng)物來源的材料相比，由于減少了感染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，使用安全，所以 越來越受到廣大愛美人士的青睞，但是人工合成的高分子材料應(yīng)具備良好的生物相容性才 能在混合凝膠中使用。但是并不是所有材料都適合做透明質(zhì)酸凝膠的添加成分，為了能夠 在透明質(zhì)酸凝膠中混合均勻，注*入人*后不易集結(jié)，必須要求這種材料為既親油又親水， 即兩親性質(zhì)的。

注射用聚乳酸微球和交聯(lián)透明質(zhì)酸混合 凝膠，但是聚乳酸微球的親水性差，不利于在人體水環(huán)境中分散，注射入人體 后容易集結(jié)成塊，并且難以在透明質(zhì)酸凝膠中分散均勻。所以聚乳酸不是理想的注射填充 材料。



注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠包括：兩親性微球和 透明質(zhì)酸凝膠的鹽溶液組成；其中微球平均粒徑為1~200 μπι，微球在混合凝膠中的質(zhì)量 分?jǐn)?shù)為1~50%，鹽溶液為滲透壓250~350 m0sm/L、pH6. 5~7. 5的氯化鈉溶液或磷酸鹽 緩沖溶液（PBS)。

制備方法為：兩親性微球與透明質(zhì)酸凝膠混合，在滲透壓250~350 mOsm/L、 pH6. 5~7. 5的氯化鈉溶液或磷酸鹽緩沖溶液中混合均勻，用溫度為115~125°C的高壓蒸 汽滅菌15~35分鐘，灌裝在預(yù)灌封注射器中，得到注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝 膠。

微球材料為兩親性材料，疏水端為脂肪碳鏈、芳香烴、酯基、硅烷等，親水端為 羧基、羥基、氨基、醚鍵等。包括聚左旋乳酸-乙二醇（PLLA-PEG)、聚乙丙交酯（PLGA)，聚乙 丙交酯-乙二醇（PLGA-PEG)，聚左旋乳酸-透明質(zhì)酸（PLLA-HA)，聚乙丙交酯-透明質(zhì)酸 (PLGA-HA)等。
透明質(zhì)酸凝膠成分包括透明質(zhì)酸，或?yàn)榻宦?lián)的透明質(zhì)酸。凝膠成分還可以為 動(dòng)物源的膠原蛋白、殼聚糖、氨基酸、纖維素、海藻酸鈉等。

含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠的制備方法包括以下步 驟：

(1)將兩親性微球材料加入到油相中溶解，然后滴加到含質(zhì)量分?jǐn)?shù)〇. 1~5%的表面活 性劑的水溶液中，滴加速度為50~60滴/分鐘，滴加完畢，常溫?cái)嚢?~2小時(shí)，除去油相 溶劑得反應(yīng)液，過濾反應(yīng)液收集濾餅，篩分出10~60 μ m的微球。

 (2)將透明質(zhì)酸溶于pH6. 5~7. 5的氯化鈉溶液或磷酸鹽緩沖溶液中，調(diào)節(jié)滲透壓 至250~350 mOsm/L即得凝膠，透明質(zhì)酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20~30%。

 交聯(lián)透明質(zhì)酸凝膠的制備包括以下步驟：將透明質(zhì)酸溶于注射用水中，再加入氫 氧化鈉溶液，后加入二乙烯基砜或1，4-丁二醇二縮水甘油醚，攪拌得到交聯(lián)透明質(zhì)酸，后 用鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至6. 5~7. 5,用PBS溶液或生理鹽水調(diào)節(jié)滲透壓至250~350 mOsm/ L得凝膠。

所述的氫氧化鈉溶液的濃度為0· 1~10 mol/L，鹽酸溶液的濃度為0· 1~10 mol/ L，二乙烯基砜或縮水甘油醚的濃度為0. 1~10 mg/mL，所述透明質(zhì)酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20~ 30%

(3)將上述方法制備的兩親性微球加入到透明質(zhì)酸鈉凝膠中，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10~ 30%，在100~1，000轉(zhuǎn)/分下攪拌1~72小時(shí)混合均勻。用溫度為115~125°C的高壓蒸 汽滅菌15~35分鐘，灌裝在預(yù)灌封注射器中，得到注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝 膠。

將兩親性微球直接與透明質(zhì)酸凝膠混合，兩親性微球容易均勻分布在凝膠 中，注射入人體后，在人體水環(huán)境下不易集結(jié)成塊。使用本發(fā)明兩親性微球作為填充劑被注 射入皮膚后，可以刺激人體膠原蛋白再生，使老化的肌膚重新富有彈性，效果自然漸進(jìn)、顯 著而持久，重塑美麗自然的容顏。本發(fā)明提供的注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠 產(chǎn)品均勻細(xì)膩、易于注射無菌無熱原，對(duì)皮膚無刺激作用，在局部存留時(shí)間長(zhǎng)、可塑性好、副 作用少，消除皺紋效果明顯；本發(fā)明的制備工藝條件易于控制，操作步驟少，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。

將8 g分子量為120, 000的、LA/GA=90/10的PLGA加入到80 mL二氯甲烷中溶解， 然后滴加到160 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的聚乙烯醇水溶液中，滴加速度為50~60滴/分鐘，滴加 完畢，常溫?cái)嚢?小時(shí)，升溫至45°C，除去二氯甲烷得反應(yīng)液，過濾反應(yīng)液收集濾餅，篩分出 5 g 25~45 μ m的微球。

將0. 4 g透明質(zhì)酸溶于2 mL注射用水中，加入20%的氫氧化鈉溶液0. 2 mL，加 入1，4- 丁二醇二縮水甘油醚15 μ L，加入4 mL 2. 6 mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6. 5~7. 5， 再加入1%的鹽酸利多卡因7 mL，再加入PBS緩沖溶液5 mL調(diào)節(jié)滲透壓至250~350 mOsm/ L即得凝膠，得透明質(zhì)酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的凝膠20 mL。
將上述方法制備的5 g PLGA微球加入到20 mL透明質(zhì)酸鈉凝膠中300轉(zhuǎn)/分 下攪拌6小時(shí)混合均勻。用溫度為121°C的高壓蒸汽滅菌35分鐘，無菌灌裝在I mL預(yù)灌封 注射器中，得到注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠。

將10 g分子量為141，000的PLLA-PEG，其中PLLA分子量為140, 000, PEG分子量 為1，000,加入到100 mL二氯甲烷中溶解，然后滴加到200 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的聚乙烯醇水溶 液中，滴加速度為50~60滴/分鐘，滴加完畢，常溫?cái)嚢?小時(shí)，升溫至45°C，除去二氯甲 燒得反應(yīng)液，過濾反應(yīng)液收集濾餅，篩分出6 g 25~45 μ m的微球。

將0. 4 g透明質(zhì)酸溶于2 mL注射用水中，加入20%的氫氧化鈉溶液0. 2 mL，加 入1，4- 丁二醇二縮水甘油醚15 μ L，加入4 mL 2. 6 mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6. 5~7. 5， 再加入1%的鹽酸利多卡因7 mL，再加入PBS緩沖溶液5 mL調(diào)節(jié)滲透壓至250~350 mOsm/ L即得凝膠，得透明質(zhì)酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的凝膠20 mL。

高剪切乳化機(jī)就是高效、快速、均勻地將一個(gè)相或多個(gè)相（液體、固體、氣體）進(jìn)入到另一互不相溶的連續(xù)相（通常是液體）的過程。而在通常情況下各個(gè)相是互不相溶的。當(dāng)外部能力輸入時(shí)，兩種物料重組成為均一相。由于轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的高切線速度和高頻機(jī)械效應(yīng)帶來的強(qiáng)勁動(dòng)能，是物料在定、轉(zhuǎn)子狹窄的間隙中受到強(qiáng)烈的機(jī)械及液力剪切、離心擠壓、液層摩擦、撞擊撕裂等綜合作用，形成懸乳液、乳液和泡沫。從而使不相溶的固相、液相、氣相在相應(yīng)成熟工藝和適量添加劑的共同作用下，瞬間均勻精細(xì)的分散乳化，經(jīng)過高頻的循環(huán)往復(fù)，*終得到穩(wěn)定的高品質(zhì)產(chǎn)品。
 

高剪切分散乳化機(jī)，主要用于微乳液及超細(xì)懸浮液的生產(chǎn)。由于工作腔體內(nèi)三組分散頭（定子+轉(zhuǎn)子）同時(shí)工作，乳液經(jīng)過高剪切后，液滴更細(xì)膩，粒徑分布更窄，因而生成的混合液穩(wěn)定性更好。三組分散頭均易于更換，適合不同的工藝應(yīng)用。該系列中不同的型號(hào)的機(jī)器都有相同的線速度和剪切率，非常易于擴(kuò)大生產(chǎn)。適宜的溫度，壓力與粘度參數(shù)與DISPERSING一樣。也符合CIP/SIP清潔標(biāo)準(zhǔn)，適合食品及醫(yī)藥生產(chǎn)。